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特邀开讲视频

开讲视频测试题

1、视频“细胞生物学实验技术在人类疾病治疗中的应用实例”中，讲到镰刀型贫血病基因治疗涉及的细胞生物学技术包括下面哪些？
    a、骨髓干细胞培养
    b、基因转染与定点整合
    c、基因检测与鉴定
    d、红细胞形态观察与功能验证

2、脑彩虹技术的本质是用多种彩色染料对大脑组织进行复染。

3、开发tnf抗体类药物的依据是，细胞表面存在引起细胞凋亡的tnf受体。

实验第一部分：显微观察设备及使用

第一单元测试

1、可利用针孔成像增加观察标本的清晰度的显微镜是（ ）。
    a、超高分辨显微镜
    b、扫描电子显微镜
    c、透射电子显微镜
    d、激光扫描共聚焦显微镜

2、具有纳米级分辨率的光学显微镜是（ ）。
    a、超高分辨显微镜
    b、激光扫描共聚焦显微镜
    c、相差显微镜
    d、扫描电子显微镜

3、用荧光显微镜观察荧光染色标本时，光源的正确使用方法是（ ）。
    a、直接在荧光光源下观察
    b、直接在可见光光源下观察
    c、先在可见光下调焦和放大，再在荧光下观察
    d、同时打开可见光和荧光观察

4、荧光显微镜的荧光光源由高压汞灯提供。高压功能开启后至少应在（ ）分钟后关闭，以免水银蒸发不完导致汞灯易损坏。
    a、5
    b、15
    c、30
    d、60

5、倒置荧光显微镜的荧光光源由（ ）灯提供。
    a、卤素灯
    b、紫外灯
    c、高压汞灯
    d、led灯

6、普通光学显微镜的分辨率是200微米。

7、相差显微镜能够变相位差为振幅差，增加观察目标与背景的反差。

8、利用倒置荧光显微镜观察细胞标本时，不进行荧光观察时要及时将荧光挡板拉至不通光位置。

9、为了便于在显微镜下尽快找到细胞观察目标，视频1.2和1.3中建议使用的特别调焦方法是画线辅助调焦法。

10、因体内细胞同时存在能够引起细胞凋亡的tnf受体和引起炎症的tnf受体，因此可根据不同的治疗目的开发tnf类药物和tnf抗体类药物。

第一单元作业

1、简述使用普通光学显微镜的一般步骤。

实验第二部分：细胞制片技术

第二单元测试

1、要进行贴壁细胞的免疫组化研究，最简单的制片方法是（ ）。
    a、铺片法
    b、印片法
    c、涂片法
    d、爬片法
    e、装片法

2、血涂片瑞氏染色结果整体偏蓝的原因是（ ）。
    a、染色时间太长
    b、染色时间太短
    c、缓冲液偏碱性
    d、缓冲液偏酸性

3、视频2.3中，下面哪一步对洋葱根尖组织压片分散难易程度意义不大？
    a、用盐酸浸泡洋葱根尖
    b、用水浸泡洋葱根尖
    c、镊子后端敲打盖玻片
    d、用刀片将根尖组织切成小块

4、制作冰冻切片时，切片呈乳糜状的主要原因是（ ）。
    a、冷冻温度过低
    b、冷冻温度偏高
    c、冷冻时间太短
    d、冷冻时间太长

5、腹腔液可以用下面哪些方法制备显微观察标本？
    a、铺片法
    b、印片法
    c、涂片法
    d、爬片法

6、制作徒手切片时，右手持刀切割的正确方向是从左前方向右后方。

7、瑞氏染色的细胞标本片上如出现大量染料沉积影响观察时，可用水反复冲洗除去。

8、用于电子显微镜观察细胞超微结构的标本称之为电镜超薄切片，厚度一般为50~100纳米。

9、动物组织材料的快速切片方法是冰冻切片法。

10、瑞氏染色的细胞标本片上如出现大量染料沉积影响观察时，可用水反复冲洗除去。

第二单元作业

1、制备良好的细胞标本片需要考虑哪些因素？

实验第三部分：细胞的获取与分离

第三单元测试

1、下面细胞分离方法中，分离纯度最高的是（ ）。
    a、密度梯度离心法
    b、差速贴壁法
    c、磁珠分选法
    d、流式细胞分选法

2、密度梯度离心法分离血液单个核细胞时，离心后单个核细胞分布于（ ）。
    a、上层液体中
    b、下层液体中
    c、两液中间
    d、底部沉淀中

3、研磨法分离的单个核细胞活率偏低的原因不包括（ ）。
    a、研磨力度过大
    b、反复研磨
    c、用缓冲液将研磨下来的细胞及时冲入滤网下
    d、脾脏材料不新鲜

4、抽取小鼠腹腔液的正确方法是（ ）。
    a、打开腹部皮肤和腹膜，用胶头吸管从腹腔吸取
    b、不用打开腹部皮肤和腹膜，直接将注射器扎进腹腔吸取
    c、打开腹部皮肤和腹膜，用注射器从腹腔吸取
    d、只打开腹部皮肤而不打开腹膜，用手从外侧推开腹部内脏后用注射器从腹腔空隙处吸取

5、被实验小鼠咬伤后，需要注射狂犬疫苗或同时注射狂犬免疫球蛋白，有效注射时间不能超过（ ）。
    a、6小时
    b、12小时
    c、24小时
    d、48小时

6、酶解法制备植物原生质体时，复合酶液中含有纤维素酶、果胶酶、胰蛋白酶等。

7、漂浮法纯化原生质体时，离心后原生质体应出现于两液交界处。

8、用磁分选仪分离表面有特定抗原的细胞时，混合细胞悬液流过磁场中的分离柱时，先流出来的细胞就是目标细胞。

9、用流式细胞仪分选细胞前细胞需要先进行荧光染色或用荧光抗体标记。

10、原生质体漂浮液中用不同浓度的葡萄糖调节溶液的漂浮密度。

第三单元作业

1、总结从组织获取离散细胞的方法。

实验第四部分：细胞培养

第四单元测试

1、动物细胞培养常用的条件为（ ）。
    a、25℃,8%co2
    b、25℃,5%co2
    c、37℃,5%co2
    d、37℃,8%co2

2、贴壁细胞传代培养一般用下面哪种酶消化细胞？
    a、酸性磷酸酶
    b、碱性磷酸酶
    c、乳酸脱氢酶
    d、胰酶

3、细胞在下面哪种条件可以长期保存？
    a、4℃
    b、-196℃
    c、-20℃
    d、-80℃
    e、37℃
    f、室温

4、细胞冻存后的复苏在下面哪种温度条件下进行较好？
    a、4℃
    b、-196℃
    c、-20℃
    d、-80℃
    e、37℃
    f、室温

5、细胞培养物中有（ ）污染时，显微镜下不可见。
    a、真菌
    b、酵母
    c、细菌
    d、支原体

6、贴壁细胞传代培养用酶消化前用hanks溶液清洗细胞。

7、细胞培养需要严格的无菌条件，一般用高压蒸汽消毒法消毒细胞培养液。

8、细胞培养操作过程，将已提前消过毒的器皿从超净台外移入超净台前无需再用酒精棉球消毒表面。

9、细胞冻存液中的dmso对人有毒，如不小心沾到皮肤上，要尽快用大量水或浓度 1%~5%的氨水冲洗。

10、培养细胞过程中，细胞培养液颜色呈紫色时必须换液。

第四单元作业

1、简述体外进行细胞培养需要的基本条件。

实验第五部分：细胞增殖与活力的研究方法

第五单元测试

1、在细胞增殖与活力研究的检测方法中，（ ）能适用于失去活性的样品进行检测。
    a、细胞计数法
    b、mtt法
    c、cfse增殖分析法
    d、ki-67标记法

2、采用细胞计数板计数，滴加细胞悬液时如果计数室出现了气泡，那么此时细胞计数的结果与实际细胞密度相比（ ）。
    a、偏大
    b、偏小
    c、偏大
    d、不确定

3、下面哪种方法广泛应用于大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及药敏试验等。
    a、细胞计数法
    b、mtt法
    c、cfse增殖分析法
    d、ki-67标记法

4、cfse是一种荧光染料，与细胞内的蛋白反应使细胞带有荧光，成为一种良好的细胞标记物。cfse增殖分析法需要借助下面哪一个设备来检测？
    a、细胞计数板
    b、酶标仪
    c、流式细胞仪
    d、荧光显微镜

5、下面哪一项表述不正确？
    a、mtt有致癌性，需戴手套使用
    b、mtt对菌敏感，使用时应无菌操作
    c、避免mtt分解，应避光保存
    d、mtt比较稳定，一般室温保存

6、细胞计数板的计数室由9个大方格组成，每个大方格的面积是1平方毫米，一个大方格内的细胞悬液体积是1微升。

7、台盼蓝染色排阻法可评价细胞活力，用于区分死细胞和活细胞，染上蓝色的为活细胞。

8、mtt被还原形成的有色沉淀堆积在细胞里，可直接通过比色反映细胞活性。

9、采用流式细胞仪进行cfse增殖分析法能定量分析细胞增殖的比例与次数。

10、进行细胞计数操作时，滴加的细胞悬液里不能有气泡，否则计数结果不准确。

第五单元作业

1、用血球计数板计数时，哪些步骤易造成误差？如何避免误差？

实验第六部分：细胞凋亡的研究方法

第六单元测试

1、细胞凋亡检测方法中，下面哪个方法能在组织水平上对凋亡细胞进行原位测定，敏感性高。
    a、形态学观察
    b、流式细胞术
    c、琼脂糖dna电泳
    d、tunel染色

2、荧光显微镜观察annexinv-fitc/pi标记的细胞样品时，下面哪种现象说明该细胞属于凋亡晚期状态？
    a、细胞没有任何荧光
    b、细胞膜表面有一圈绿色荧光
    c、细胞仅染上pi荧光
    d、细胞染上两种荧光

3、流式细胞仪的散点图中，前向散射光(fsc) 强度反映细胞的大小，侧向散射光(ssc)反映细胞内部的复杂度。

4、dna 断裂是细胞凋亡最显著的特点，细胞凋亡时dna 会被降解形成200bp或其整数倍的片段，琼脂糖凝胶电泳检测呈现梯状带型。

5、细胞样品进行荧光标记后的操作都应尽量在避光条件下进行。

实验第七部分：细胞自噬的研究方法

第七单元测试

1、观察自噬现象最直接的方法，也是判断自噬现象的金标准是采用（ ）。
    a、荧光显微镜检测
    b、透射电子显微镜
    c、溶酶体活性测定
    d、western检测

2、细胞发生自噬后，细胞内表达的gfp-lc3蛋白其荧光分布发生什么现象？
    a、整个细胞绿色荧光明显减弱
    b、胞质荧光消失，但胞核内有荧光
    c、荧光呈大量亮点状散布在胞质里
    d、整个细胞绿色荧光增强

3、在饥饿或化学因素的诱导下细胞发生自噬，先形成自噬体，随后与溶酶体膜融合，形成自噬溶酶体，借助溶酶体水解酶来降解内含物。

4、正常培养的细胞不会发生细胞自噬现象。

5、自噬泡是双层膜包裹的囊泡，而溶酶体是单层膜包裹的膜泡。

实验第八部分：细胞迁移与侵袭的研究方法

第八单元测试

1、细胞划痕实验反映细胞迁移能力，以下哪个因素不影响实验结果？
    a、细胞增殖速度
    b、划痕的间距大小
    c、培养时间长短
    d、细胞种类

2、transwell 培养结束后一般采用哪个染色液进行染色观察？
    a、吉姆萨染液
    b、台盼蓝染液
    c、瑞氏染液
    d、结晶紫染液

3、划痕愈合实验适用于所有贴壁细胞的迁移能力检测。

4、需细胞长满培养板底部时才适合进行划痕愈合实验。

5、下层培养液和小室间常会有气泡产生，气泡对实验没影响。