中国大学mooc分子生物学实验试题及答案-k8凯发

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1 无菌操作技术与主要仪器设备的使用

无菌操作技术与主要仪器设备的使用单元测验

1、1. 使用超净工作台进行无菌操作实验前，至少开启紫外灯照射杀菌 。
    a、5min
    b、15min
    c、30min
    d、10min

2、制作固体平板时，加入抗生素时所用培养基的适宜温度一般为 。
    a、20-30℃
    b、30-40℃
    c、50-60℃
    d、70-80℃

3、制作酒精棉球常用的酒精浓度为 。
    a、50%
    b、75%
    c、85%
    d、95%

4、配制lb固体培养基常用的琼脂浓度为 。
    a、1.0-2.0%
    b、4%
    c、3%
    d、0.3%

5、lb培养基灭菌的常用方法是 。
    a、紫外线消毒
    b、煮沸法灭菌
    c、高压蒸汽灭菌
    d、干热灭菌

6、琼脂在lb固体培养基中的作用是提供 。
    a、碳源
    b、氮源
    c、生长因子
    d、凝固因子

7、关于视频中溶液的配制，下列说法正确的是 。
    a、配制溶液时，一般先调ph，然后再定容。
    b、使用酚-氯仿-异戊醇溶液时，需要吸取下层溶液使用。
    c、配制溶液ⅰ时，可以使用0.5mol/l edta母液配制，也可以加入已称量好的edta干粉配制。
    d、配置好的50mg/ml羧苄青霉素溶液，可以直接使用，不用过滤除菌。

8、使用离心机时，一定要将同样重量的离心管对称放入离心转子内让离心机的轴受力平衡。

9、电子天平使用时一定要调水平，并依据称量需求选择不同精度和量程的天平。

10、高压灭菌结束后，压力降到0 mpa时就可以从高压锅内取出灭菌物品。

11、配制edta溶液时，edta在碱性条件下才能溶解。

12、以水为溶剂配制的抗生素溶液需要过滤除菌后才能使用。

13、一般tris 饱和酚用于分离 dna，水饱和酚用于分离rna

2 琼脂糖凝胶电泳和sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳

琼脂糖凝胶电泳和sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳单元测验

1、琼脂糖凝胶电泳检测2000bpdna时，比较合适的凝胶浓度是 。
    a、0.5%
    b、1%
    c、3%
    d、4.5%

2、关于核酸染料goldview的说法，错误的是 。
    a、使用时带手套
    b、goldview的工作浓度为5μl/100ml胶液
    c、凝胶溶液温度降到50-60℃时方可加入goldview
    d、goldview对皮肤眼睛没有刺激作用

3、相同分子大小的超螺旋dna分子和线性dna分子在琼脂糖凝胶中进行电泳时，它们的迁移快慢顺序是 。
    a、超螺旋dna分子快，线性dna分子慢
    b、超螺旋dna分子慢，线性dna分子快
    c、两者一样快
    d、两者一样慢

4、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，影响蛋白样品迁移率的因素是 。
    a、所带电荷多少
    b、蛋白形状
    c、蛋白分子大小
    d、蛋白浓度

5、最适合用来分离100kd蛋白的聚丙烯酰胺凝胶的t值是 。
    a、20%
    b、15%
    c、10%
    d、5%

6、对不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳说法，不正确的是 。
    a、包括2层凝胶（分离胶和浓缩胶），两层凝胶的缓冲液ph和凝胶孔径大小都不连续
    b、电泳时，样品先进入浓缩胶被浓缩，然后进入分离胶得以分离
    c、整个电泳体系中的缓冲液ph 值和凝胶孔径大小相同
    d、主要用于蛋白质样品的分离与分析

7、检测核酸的常用染料有 。
    a、eb
    b、sybr
    c、goldview
    d、考马斯亮蓝

8、琼脂糖凝胶电泳的全过程包括 。
    a、凝胶的制备
    b、制样和上样
    c、电泳
    d、检测

9、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本过程包括 。
    a、制备分离胶
    b、制备浓缩胶
    c、电泳
    d、检测

10、dna分子在含1×tae电泳缓冲液的琼脂糖凝胶电泳中从正极向负极迁移。

11、琼脂糖凝胶电泳时，一般在每厘米凝胶20-30v的恒压下进行。

12、制备琼脂糖凝胶时，可以直接用蒸馏水配置凝胶溶液。

13、配聚丙烯酰胺凝胶时先配浓缩胶再配分离胶。

14、蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳必须使用sds，如果没有sds处理电泳结果毫无意义。

15、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白的迁移率与其分子量成线性关系。

3 目的基因akp扩增及pcr产物的检测与回收

目的基因akp及pcr产物的检测与回收单元测验

1、有关pcr的描述，错误的是 。
    a、pcr反应是一种酶促反应
    b、一般选用94℃进行模板变性
    c、扩增的对象是dna序列
    d、扩增的对象是氨基酸

2、pcr实验的特异性主要取决于 。
    a、dna聚合酶的种类
    b、反应体系中模板dna的量
    c、引物序列的结构和长度
    d、四种dntp的浓度

3、pcr产物短期存放的最佳温度条件是 。
    a、4℃
    b、常温
    c、-80℃
    d、高温

4、taq dna聚合酶的最适温度是 。
    a、37℃
    b、50-55℃ 
    c、70-75℃ 
    d、80-85℃

5、pcr产物回收的目的是 。
    a、去除taq酶
    b、去除多余的引物
    c、去除大部分非特异性pcr产物
    d、回收特异性pcr产物

6、关于凝胶中dna回收的说法，正确的是 。
    a、高盐吸附，低盐洗脱
    b、吸附柱中含有能可逆吸附dna分子的基质
    c、膜结合液中含乙醇
    d、漂洗液中含乙醇

7、pcr中的引物是一小段同dna互补的rna分子。

8、pcr反应的循环过程包括变性、退火和延伸。

9、pcr具有特异性、高效性和操作简单等特点。

10、凝胶成像仪可直接用来检测pcr产物回收是否成功，且用于检测的产物还能在后续基因克隆实验中直接使用。

4 质粒dna提取及电泳检测

质粒dna提取及电泳检测单元测验

1、用碱裂解法提取质粒dna的基本原理是 。
    a、染色体dna断裂成碎片
    b、染色体dna分子量大不能释放
    c、染色体dna变性后不如质粒dna复性快
    d、染色体未与蛋白质分开而沉淀

2、提取质粒dna过程中，向氯仿-异戊醇处理的上清液中加入无水乙醇的主要目的是 。
    a、去除蛋白
    b、去除断裂的基因组dna
    c、浓缩和沉淀质粒dna
    d、去除rna

3、rte试剂中能抑制dna酶活性的化学物质是 。
    a、edta
    b、rna酶
    c、tris
    d、盐酸

4、关于碱裂解法分离质粒dna的说法，错误的是 。
    a、溶液ⅰ的作用是悬浮菌体
    b、溶液ⅱ的作用是使dna变性
    c、溶液ⅲ的作用是使dna复性
    d、质粒dna分子小没有变性

5、碱裂解法提取质粒时，裂解大肠杆菌所需要的成分是 。
    a、0.2m naoh
    b、0.4m na2co3
    c、0.4m nahco3
    d、1.0% sds

6、质粒dna提取过程中可以使用旋涡振荡的操作步骤包括 。
    a、菌体重悬
    b、加入溶液ⅱ后的菌体裂解
    c、加入溶液ⅲ后的混匀中和
    d、加入75%乙醇清洗沉淀的质粒dna

7、碱裂解法分离质粒dna是根据质粒dna与染色体dna的分子量差异而设计的。

8、染色体dna与蛋白-sds钾盐结合在一起形成微溶性复合物，离心后沉淀中含有染色体dna，而上清中含有质粒dna。

9、碱裂解法提取的质粒dna分子全部具有超螺旋结构。

10、酚-氯仿-异戊醇试剂中氯仿的作用是使水相和有机相分界更为明显。

5 重组dna的制备及大肠杆菌感受态细胞的转化

重组dna的制备及大肠杆菌感受态细胞的转化单元测验

1、需要atp作为辅助因子的酶是 。
    a、bamh i
    b、hind iii
    c、t4 dna 连接酶
    d、ecor i

2、能产生平末端的限制性内切酶是 。
    a、ecor i
    b、bamh i
    c、hind iii
    d、alu i

3、用于转化大肠杆菌感受态细胞且能在平板上长出菌落的物质是 。
    a、质粒dna
    b、目的基因
    c、基因组dna
    d、cdna

4、在蓝白斑筛选中，可做为β-半乳糖苷酶的底物是 。
    a、iptg
    b、x-gal
    c、磷酸钠
    d、edta

5、hindiii的同裂酶 是 。
    a、bamh i
    b、xhoi
    c、ecor i
    d、hsui

6、大肠杆菌热激转化实验过程中，常用的热激温度和时间分别是 。
    a、80℃ 90 s
    b、4℃ 90s
    c、42℃ 90 s
    d、70℃ 90 s

7、制备大肠杆菌感受态细胞的实验操作过程中，需要注意 。
    a、无菌
    b、动作轻柔
    c、冰浴保持低温
    d、可以使用旋涡振荡仪振荡混匀

8、大肠杆菌感受态细胞制备及转化的步骤包括 。
    a、细胞扩增
    b、感受态细胞制备
    c、转化
    d、复苏

9、星号效应是在非最优条件下某些限制性内切酶对识别和切割序列的特异性下降的现象。

10、连接酶对限制性内切酶切割产生的粘性末端和平末端连接效率没有区别。

11、在连接质粒和外源dna的限制性内切酶酶切后的片段时，应该把此两种dna按1:1的摩尔比混合进行连接反应。

12、在转化过程中，热激后加入lb液体培养基进行复苏，复苏可以使细胞得到修复，同时使抗性基因得到表达

6 阳性重组子的筛选及外源基因的诱导表达

阳性重组子的筛选及外源基因的诱导表达单元测验

1、不能用来筛选重组子的筛选方法是 。
    a、抗药性筛选
    b、蓝白筛选
    c、限制性酶切法
    d、pcr 法

2、可以确保重组子中的外源基因没有突变的方法是 。
    a、蓝白筛选
    b、核酸杂交
    c、dna测序
    d、pcr法

3、可以用来确定所表达的蛋白是否具有功能的方法是 。
    a、elisa
    b、sds-聚丙烯酰胺电泳
    c、测试酶活
    d、western blot

4、基因表达不涉及的步骤是 。
    a、复制
    b、转录
    c、翻译
    d、蛋白折叠

5、使用克隆时同样的限制性内切酶切割4kb质粒载体和1kb外源dna重组形成的重组质粒后，琼脂糖电泳分析的结果是 。
    a、一条5kb的条带
    b、两条条带，分别时2kb和3kb
    c、两条条带，分别是1kb和4kb
    d、一条4kb的条带

6、关于外源基因的诱导表达的说法，正确的是 。
    a、扩大培养细胞需要细菌生长到合适的生长密度才可诱导表达
    b、该实验表达akp使用的诱导物是iptg
    c、表达蛋白需要使用表达菌株，而不是克隆菌株
    d、加入诱导物后，可以在37度诱导表达

7、常用的核酸水平筛选重组子方法有 。
    a、pcr法
    b、直接电泳检测法
    c、限制性酶切图谱法
    d、核酸杂交检测法

8、筛选可以判定某个克隆是重组子还是非重组子。

9、pcr法可以确定某个克隆是否是重组子，但是无法确定其重组质粒中外源dna的大小是否正确。

10、限制性酶切筛选法只能确定是转化子还是非转化子。

11、测定酶活性和蛋白分子大小是蛋白水平的筛选。

12、使用sds-聚丙烯酰胺电泳可以对目标蛋白的表达进行粗略筛选。

13、阳性重组质粒dna转化表达菌株以便获得表达工程菌，还可在蛋白水平进一步筛选目的重组子。

14、可以在任何大肠杆菌中利用t7表达体系表达外源基因。

15、在诱导表达外源基因时，通常需要优化培养条件如培养温度、诱导物的浓度、培养基组成等，以便得到可溶的、较好的蛋白表达量和蛋白酶活性。

7 外源基因表达产物的检测

外源基因表达产物的检测单元测验

1、测试细胞内碱性磷酸酶活性不需要的实验步骤是 。
    a、离心
    b、细胞破碎
    c、加入测活液
    d、16℃水浴恒温10min

2、不常用的细胞破碎法是 。
    a、超声破碎
    b、噬菌体破碎
    c、研磨
    d、使用溶菌酶破碎

3、可终止利用对硝基苯酚磷酸测试碱性磷酸酶活性反应的终止液是 。
    a、氯化钠
    b、磷酸钠
    c、硫酸钠
    d、醋酸钠

4、western blot实验不需要的步骤 。
    a、封闭
    b、显色
    c、脱色
    d、漂洗

5、实验中使用超声方法破碎细胞时，超声破碎的条件包括时间、功率等是通过实验摸索出来的，摸索的依据是 。
    a、蛋白表达多少
    b、细胞破碎的程度
    c、破碎后样品的活性
    d、蛋白是否是可溶性表达

6、western blot实验需要 。
    a、一抗溶液
    b、5%脱脂奶粉
    c、pbs缓冲液
    d、bamh i

7、将凝胶、nc膜、滤纸浸泡印迹缓冲液的作用是 。
    a、使凝胶中的sds游离出来
    b、增加nc膜的结合容量
    c、提高nc膜与蛋白的亲和力
    d、封闭nc膜上的吸附位点

8、western blot中，印迹时电流从负极移向正极，使得蛋白样品从凝胶上转移到nc膜上。

9、细胞可以通过反复冻融来破碎。

10、利用对硝基苯酚磷酸作为底物来测试碱性磷酸酶活性其产物呈现红色。

11、western blot实验在转膜后必须有封闭过程。

12、western blot中其二抗必须通过将待测蛋白免疫小鼠来获得。

13、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳可用来测定蛋白亚基分子量。

8 农杆菌介导的植物转基因技术

农杆菌介导的植物转基因技术单元测验

1、关于穿梭质粒，下列说法中不正确的选项是 。
    a、可以在两种不同类群的宿主中存在和复制
    b、有且只有一套复制起始点和选择标记
    c、不但适用于原核生物，也可以适用于真核生物
    d、在农杆菌介导的植物转基因（叶盘法）过程当中，t-dna载体给体质粒是穿梭质粒

2、农杆菌介导的植物转基因技术的优势，下列说法中不正确的是 。
    a、转入的外源基因通常呈预期的孟德尔遗传
    b、可插入的外源基因通常很小
    c、操作简单，不需要特殊仪器
    d、外源基因低拷贝转入, 优先插入具有转录活性的区域

3、对应野生型ti质粒，下列说法中正确的是 。
    a、由于太大、酶切位点受限等原因，不能够直接被科学研究所应用
    b、是穿梭质粒
    c、需要辅助质粒完成其侵染植物的过程
    d、是发根农杆菌的功能质粒

4、外源基因导入植物的方法有哪些 。
    a、直接转化法
    b、化学诱导法
    c、生殖细胞侵染法
    d、病毒介导法

5、农杆菌介导的植物转基因技术，下列说法中不正确的是 。
    a、可以根据研究目的和特点选择不同的方法，且都可以获得稳定的转基因植株。
    b、野生型ti质粒具有植物转基因的所需的各种原件，只要将目的基因插入该质粒中，便可以用于科学研究。
    c、农杆菌介导的植物转基因技术相对简单且高效
    d、对于双子叶植物，使用农杆菌介导的转基因方法，基因沉默现象少, 基因转化的效率高。

6、下列关于制作叶盘（外植体）的操作正确的是 。
    a、选取嫩叶叶片
    b、随机剪成不同的大小的叶盘
    c、剪去主叶脉后，再剪成不同大小的叶盘
    d、消毒和剪制操作需要在无菌环境下完成

7、下列缩写中，对应正确的是 。
    a、str:链霉素
    b、rif:利福平
    c、kana:卡那霉素
    d、amp:氨苄青霉素

8、t-dna可以在目标宿主植物染色体的任何区域内插入，但不会造成任何插入失活。

9、农杆菌介导的植物转基因技术，都可以获得稳定的转基因植物。

10、双元载体系统中的两个质粒（ti辅助含质粒和t-dna给体载体质粒）是两个相容的质粒。

11、t-dna给体载体质粒含有了目的基因和抗性基因，可以独立完成植物转基因过程。

12、在转基因操作过程中，外植体制备过程中不需要无菌操作，但在转化过程中是需要无菌的。

9 三亲接合法转化蓝藻

三亲接合法转化蓝藻单元测验

1、用于三亲接合转化的蓝藻是处于哪个生长阶段 。
    a、迟缓期
    b、对数期
    c、稳定期
    d、衰亡期

2、三亲接合法中，运载菌和接合辅助菌的混合比例是 。
    a、1：1
    b、10：1
    c、1：2
    d、1：5

3、三亲接合法中，菌菌混合液与蓝藻的的混合比例是 。
    a、1：2
    b、10：1
    c、1：1
    d、1：5

4、三亲接合法中的“三亲”是指 。
    a、运载菌
    b、接合辅助菌
    c、蓝藻
    d、细菌

5、蓝藻进行生物转化的方式 。
    a、电转化
    b、自然转化法
    c、三亲接合法
    d、氯化钙转化法

6、三亲接合法中，运载菌和接合辅助菌的培养条件是30℃，190r/min。

7、三亲接合法中，蓝藻的培养条件是30℃，135r/min。

8、三亲接合法中，运载菌中的质粒是带有目的基因的能在蓝藻中表达的质粒。

9、三亲接合法中，运载菌和接合辅助菌只需活化1次。

10、三亲接合法中，蓝藻的细胞数目要达到10的7次方。

10 实时荧光定量pcr方法检测小鼠脾细胞特定基因的表达

实时荧光定量pcr方法检测小鼠脾细胞特定基因的表达单元测验

1、rt-pcr获得目的基因时为什么要先提取rna再反转录 。
    a、rna稳定性高，不易被降解
    b、rna可检测出基因表达的差异
    c、rna为单链线性分子，结构简单
    d、以上都是

2、哪种方法可以破坏rna酶活性 。
    a、煮沸
    b、温和变性剂
    c、乙二胺四乙酸（edta）
    d、焦磷酸二乙酯（depc）

3、以下哪项不是抑制或破坏rna酶活性的做法 。
    a、所用器皿和耗材两次高压灭菌
    b、0.1 % depc溶液处理
    c、尽量简化操作步骤
    d、edta溶液处理

4、关于rna特性的描述不正确的是 。
    a、是单链线性分子
    b、具有不稳定性，易被降解
    c、易被rna酶破坏
    d、rna较稳定

5、rna酶内有 使其耐热，耐酸碱。
    a、氢键
    b、二硫键
    c、离子键
    d、共价键

6、焦磷酸二乙酯（depc），分子式为c6h10o5，下面说法不正确的是 。
    a、是一种强烈rna酶变性剂，但不可用于内源rna酶
    b、与rna酶的活性基团组氨酸的咪唑环结合使其变性，从而抑制酶的活性
    c、无刺激性，不用在通风橱中使用
    d、一定条件下，可降解成二氧化碳和水

7、粗提rna时，加入氯仿后的现象为 。
    a、酸性酚-氯仿抽提，低ph值的酚将使rna进入水相，蛋白和dna留在有机相。
    b、苯酚和脂类溶于有机溶剂氯仿中形成有机相。
    c、氯仿密度较大，使得有机相位于下层，而水相在上层。
    d、rna在下层有机相

8、关于异硫氰酸胍在rna提取中的作用描述正确的是 。
    a、裂解细胞
    b、使得核酸蛋白复合物分离
    c、抑制细胞释放的核酸酶
    d、降解dna

9、用液氮研磨来破碎细胞，是物理法，不是化学法。

10、该实时定量pcr实验过程中，使用了基因actin做内参。

11 southern杂交

southern杂交单元测验

1、southern杂交，预杂交的温度是 。
    a、37℃
    b、55℃
    c、65℃
    d、68℃

2、本实验中制备探针的方法是 。
    a、随机引物合成法
    b、pcr法
    c、rt-pcr法
    d、生物素标记法

3、下列试剂可用于沉淀dna的有 。
    a、异丙醇
    b、无水乙醇
    c、无水甲醇
    d、70%乙醇

4、本实验中提取基因组dna时，破碎小麦叶片所用的方法 。
    a、冻融法
    b、液氮研磨
    c、加入细胞提取液
    d、超声波法

5、基因组dna进行电泳检测，所用琼脂糖凝胶的浓度是0.3%。

6、提取基因组dna时，应尽量在低温下进行。

7、southern印迹杂交是进行基因组dna特定序列定位的通用方法。

8、杂交的目的是封闭膜上所有非特异性吸附位点。

9、洗膜的目的是洗去滤膜上未与dna杂交的及非特异性杂交的探针。

10、转移膜装置中，放重物的目的是建立液体从皿中经凝胶向膜流动的液流，以洗脱凝胶中变性dna，并使其聚集在膜上。

12 序列比对与blast实验

序列比对与blast实验单元测验

1、下列关于序列的相似性与同源性概念的说法不正确的是 。
    a、相似性是序列之间相关的一种度量
    b、同源性是指序列所代表的物种具有共同的祖先
    c、序列a与b之间的序列相似性为80%
    d、序列a与b具有80%的同源性

2、下列关于序列的两两比对与多序列比对概念的说法不正确的是 。
    a、两两比对指的是两条序列之间的对齐过程
    b、多序列比对指的是三条或三条以上的序列进行对齐的过程
    c、两两比对通常需要以多序列比对为基础进行扩展
    d、blast输出的结果属于两两比对的形式

3、有关blast程序的描述不正确的是 。
    a、makeblastdb用于准备查询数据库文件
    b、blastn可用于将一条rna序列搜索蛋白质数据库
    c、blastp可用于将一条蛋白质序列搜索蛋白质数据库
    d、tblastx可用于将一条rna序列搜索核酸序列数据库

4、blast实现过程的说法不正确的是 。
    a、首先要去除低复杂度序列
    b、k-mer划分时不需要相互重叠
    c、hsp的得分需要根据替换矩阵来完成
    d、blast的输出结果会标注显著性检验指标

5、下列关于blast输出结果的描述不正确的是 。
    a、blast的输出结果有多种形式，常用的m6和m7格式
    b、bit-score指标可用于不同blast结果之间的横向比较
    c、e-value值越大，结果越可信
    d、score值越大，结果越可信

6、在查询序列长度，目标数据库大小及计算平台配置相同的情况下，哪个blast程序计算速度最慢的 。
    a、blastn
    b、blastp
    c、blastx
    d、tblastx

7、下列关于blast软件说法正确的是 。
    a、blast是一种局部比对算法
    b、blast集成了多种不同的比对程序，用于实现不同的搜索目的
    c、blast过程随着查询序列长度的增加，比对速度会越来越快
    d、blast常用的目标数据库的类型有核苷酸和蛋白质序列两种

8、下列关于序列比对的说法正确的是 。
    a、序列比对的目的就是要寻找序列之间的相似性
    b、序列比对根据比对的策略可分为全局比对和局部比对
    c、序列比对的结果可用于推断序列在结构、功能及进化方面的关系
    d、blast 工具是一种快速实现序列比对的办法

9、进行blast实验前，需要完成哪些实验准备 。
    a、安装blast主程序
    b、准备查询序列
    c、准备目标数据库
    d、安装多序列比对工具

10、下列哪些步骤可以提高blast的搜索效率 。
    a、去除查询序列中的低复杂度序列
    b、k-mer划分查询序列
    c、显著性指标计算
    d、搜索过程中只考虑高得分片段

期末考试

期末考试（客观题）

1、关于琼脂糖凝胶中dna回收的说法，错误的是 。
    a、漂洗液中含乙醇
    b、吸附柱中含有能可逆吸附dna分子的基质
    c、高盐吸附，低盐洗脱
    d、膜结合液中含乙醇

2、关于质粒载体dna的说法，错误的是 。
    a、共价闭合环状超螺旋的双链dna分子
    b、在溶液ph=8时，带负电
    c、溶于水，不溶于有机试剂如氯仿异戊醇
    d、分子量很大

3、提取质粒dna中使用的溶液i中含有edta，edta的作用是 。
    a、有利于重悬菌体
    b、增加溶液的粘度
    c、螯合溶液中的二价金属离子，抑制依赖于二价离子的dna酶活性
    d、调节溶液的ph

4、制备大肠杆菌感受态细胞时，氯化钙溶液的常用浓度是 。
    a、1 mol/l
    b、0.1 mol/l
    c、0.5 mol/l
    d、0.1 mmol/l

5、关于蓝白斑筛选说法，错误的是 。
    a、蓝白筛选可以区分转化子与非转化子
    b、蓝白筛选可以确定插入外源的序列是否正确
    c、蓝白筛选也叫α-互补
    d、蓝白筛选中，需要在固体培养基中加入诱导物iptg

6、lac表达体系中，能够解除阻遏蛋白阻遏作用的物质是 。
    a、葡萄糖
    b、乳糖
    c、半乳糖
    d、果糖

7、t7表达体系不需要 。
    a、t7 rna 聚合酶
    b、t7启动子
    c、lac 阻遏蛋白
    d、taq dna聚合酶

8、在外源基因的诱导表达实验中，加入诱导物诱导akp表达所要求的细菌生长密度（即od600为多少）大约是 。
    a、0.1
    b、1.5
    c、0.8
    d、无所谓

9、在外源基因的诱导表达实验中，诱导菌株表达碱性磷酸酶akp的诱导物是 。
    a、x-gal
    b、iptg
    c、甘油
    d、葡萄糖

10、利用对硝基酚磷酸作为底物测试碱性磷酸酶的活性，测定其产物光吸值的波长是 。
    a、410nm
    b、260nm
    c、340nm
    d、600nm

11、在外源基因的诱导表达实验中，同时表达含空质粒petblue-2的菌的目的是 。
    a、检测其表达效果
    b、该质粒也能表达出目的蛋白akp
    c、检测有无污染
    d、为阴性对照，便于比较分析结果

12、最适合用来分离50kd蛋白 聚丙烯酰胺凝胶的t值是 。
    a、4%
    b、5%
    c、12%
    d、20%

13、聚丙烯酰胺凝胶电泳中过硫酸铵aps的作用是 。
    a、交联剂
    b、加速剂
    c、凝固剂
    d、催化剂

14、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，影响蛋白样品迁移率的因素是 。
    a、所带电荷多少
    b、蛋白形状
    c、蛋白分子大小
    d、凝胶浓度

15、大肠杆菌热激转化实验过程中，常用的热激温度和时间分别是 。
    a、10℃ 90s
    b、90℃ 90 s
    c、42℃ 90 s
    d、70℃ 90 s

16、大肠杆菌碱性磷酸酶akp的主要活性是 。
    a、水解dna
    b、水解rna
    c、水解磷酸单酯
    d、水解蛋白质

17、三亲接合转化法中，蓝细菌的代谢类型是 。
    a、异养需氧
    b、异养厌氧
    c、自养厌氧
    d、光能自养需氧型

18、关于植物转基因方法选择，下列说法中不正确的选项是 。
    a、对农杆菌敏感的植物，可以优选农杆菌介导的植物转基因方法
    b、对于原生质体易于制备和培养的植物，可以选择peg介导直接转化
    c、对于多胚珠植物，可以选用显微注射法
    d、对于转化难度很大，多种方法都无效的植物，可以选用基因枪法进行尝试

19、有关农杆菌介导的植物转基因技术，不正确的是 。
    a、转入的外源基因通常呈预期的孟德尔遗传
    b、经过筛选，都可以形成转基因植株
    c、主要有叶盘法、浸花法和注射法三种方法
    d、转化效率较高，结果比较稳定

20、从碱性磷酸酶akp酶活性检测结果，可以得到的结论是 。
    a、可以筛选出目的基因
    b、可以初步确定目的基因akp已表达 且表达的蛋白有活性
    c、可以检测表达的蛋白是否全为可溶性表达
    d、可以确定其表达蛋白的分子量

21、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，影响蛋白样品迁移率的因素是 。
    a、所带电荷多少
    b、蛋白形状
    c、蛋白分子大小
    d、蛋白浓度

22、在重组子筛选实验中，从转化菌中筛选dna重组体的常用方法不包括 。
    a、α互补
    b、插入失活
    c、dna序列测定
    d、质粒的小量快速提取

23、碱裂解法提取质粒dna时，对溶液ⅱ的作用说法错误的是 。
    a、裂解细胞
    b、悬浮细胞
    c、变性蛋白
    d、变性基因组dna

24、下列有关序列比对说法不正确的是 。
    a、通过序列比对可发现不同序列之间的相似性
    b、通常分为两两比对和多序列比对
    c、序列比对用于分析序列之间在单个核苷酸或氨基酸水平上的相似性和差异性
    d、通过序列比对结果，可以通过同源性来推断相似性

25、blast结果的显著性的描述不正确的是 。
    a、e-value越小结果越显著
    b、bit-sore越大结果越显著
    c、similarity(相似性)越小说明序列之间的差异性越小
    d、identity(一致性)越高说明序列之间的相似性越大

26、与溶剂对照组dmso比较，免疫抑制剂环孢菌素a对小鼠脾细胞中il-2基因和actin基因表达的影响是 。
    a、抑制ionomycin和pma引起的小鼠脾细胞中il-2基因的表达
    b、促进ionomycin和pma引起的小鼠脾细胞中il-2基因的表达
    c、抑制小鼠脾细胞中actin基因的表达
    d、促进小鼠脾细胞中actin基因的表达

27、下列哪个试剂不是实时荧光定量pcr (quantitative real-time pcr, qrt-pcr)中需要的 。
    a、green premix taq enzyme
    b、模板cdna
    c、rna
    d、上下游引物及reference dye

28、可以确保重组子中的外源基因没有突变的方法是 。
    a、核酸杂交
    b、dna测序
    c、抗药性筛选
    d、限制性酶切法

29、在琼脂糖凝胶电泳中，哪些因素会影响dna分子在电泳中的迁移率 。
    a、分子构型
    b、带电荷多少
    c、电场中的电流电压
    d、分子大小

30、关于琼脂糖凝胶电泳说法，正确的是 。
    a、电泳时除了产生电荷效应还有分子筛效应
    b、是实验室最常用的电泳技术之一
    c、电泳后样品需要检测，才能显出带型
    d、除了用于分离核酸，也可用于分离蛋白质

31、优化pcr扩增体系，可以优化哪些因素 。
    a、模板纯度
    b、底物dntp的浓度
    c、退火温度
    d、模板序列

32、关于碱裂解法提取质粒dna的说法，正确的是 。
    a、加入无水乙醇可以沉淀浓缩质粒dna
    b、溶液ⅱ的作用是使dna变性
    c、质粒dna构象紧凑不会变性
    d、溶液ⅲ的作用是使dna复性

33、生物大分子分离纯化的依据是生物大分子之间的物理化学性质和生物学性质上的差异，比如 。
    a、分子大小
    b、形态
    c、亲和性
    d、溶解度

34、外源dna进入大肠杆菌受体细胞常用的转化方法有 。
    a、化学试剂法
    b、显微注射法
    c、电转化法
    d、原生质体转化法

35、常用的蛋白水平筛选方法有 。
    a、免疫学检测如western blot
    b、测定酶活性
    c、检测蛋白分子大小
    d、检测其结合功能或调节功能如dna结合蛋白

36、适用于petblue-2载体克隆且能进行蓝白筛选的受体细胞有 。
    a、tunertm (de3) placi
    b、dh5a
    c、jm109
    d、novablue

37、对不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳说法，正确的是 。
    a、包括2层凝胶（分离胶和浓缩胶）
    b、主要用于蛋白质样品的分离与分析
    c、ph不连续
    d、凝胶孔径不连续

38、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳具有的作用包括 。
    a、浓缩效应
    b、电荷效应
    c、分子筛效应
    d、分离效应

39、分光光度计由下面哪几部分组成 。
    a、光源
    b、样品室与检测器
    c、显示与存储系统
    d、信号处理器

40、southern印迹杂交的基本过程 。
    a、核酸制备
    b、southern转膜
    c、探针制备
    d、southern杂交及检测

41、提取小麦基因组dna时，去除蛋白质用到的试剂有 。
    a、酚
    b、氯仿
    c、异戊醇
    d、naoh

42、有关pcr的描述，正确的是 。
    a、pcr是一种在体外快速扩增特定基因或dna序列的方法
    b、pcr是以dna为模板进行扩增
    c、扩增的对象是氨基酸
    d、一般选用高温进行模板变性，低温退火，中温延伸

43、对野生型ti质粒进行改造，以便用于科学研究和生产中的植物转基因操作。改造的方法有哪些 。
    a、共和载体法
    b、双元载体系统
    c、病毒介导法
    d、隔断载体法

44、野生型ti质粒不能直接用于植物转基因操作，原因是 。
    a、质粒大，难于进行插入外源基因的构建
    b、酶切位点受限
    c、是穿梭质粒
    d、含有致植物根瘤的基因

45、关于实时荧光定量pcr的说法中正确的是 。
    a、在pcr反应中，引入一种荧光物质，随着pcr反应的进行，反应产物不断累计，荧光强度也等比例增加。
    b、循环阈值ct指的是pcr扩增过程中扩增产物的荧光信号到达设定的阈值时所经过的扩增循环次数。
    c、定量方法有绝对定量和相对定量。
    d、该技术由于具有定量、特异、灵敏和快速等特点。

46、为了观察环孢菌素a对小鼠脾细胞il-2基因表达的影响，需要在原代培养的小鼠脾细胞中加入离子霉素（ionomycin）和佛波酯（pma），其作用是 。
    a、引起胞内钙离子浓度的升高
    b、激活钙调蛋白磷酸酶
    c、引起胞内钙离子浓度的降低
    d、抑制钙调蛋白磷酸酶

47、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳可用来测定蛋白亚基分子量

48、外源基因在大肠杆菌中诱导表达不同蛋白， 使用的温度可能不同，可以是低温如16℃表达，也可能是37℃表达

49、连接反应通常在37℃下进行。

50、pcr扩增中使用的taq dna聚合酶的最适温度是50-55℃。

51、大肠杆菌感受态细胞制备过程中扩大培养细胞的生长密度一般以刚进入对数期或对数生长前期时为好。

52、琼脂糖凝胶电泳检测1800bp dna时，比较合适的凝胶浓度是1%。

53、只要一种缓冲液里面两种限制性内切酶都具有很高的活性，就可以使用它来实现双酶切。

54、在进行蓝白筛选时，在固体培养基中加入的半乳糖苷酶的底物是半乳糖。

55、蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳必须使用sds，如果没有sds处理电泳结果毫无意义。

56、不同的启动子其有不同的启动效率。

57、制备琼脂糖凝胶时，必须使用电泳缓冲液配置凝胶溶液。

58、电子天平使用时可以不用调水平，但需要依据称量需求选择不同精度和量程的天平。

59、lb培养基使用紫外线消毒灭菌后可以直接使用。

60、稀有密码子会影响到翻译的效率。

61、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳中，蛋白的迁移率与其分子量成线性关系。

62、叶盘法进行植物转基因时动作尽量轻柔，以免对叶盘造成不可逆的损伤。

63、农杆菌用于侵染植物叶盘时，对于农杆菌的数量和生长状态没有要求。

64、琼脂糖凝胶电泳过程中，超螺旋构型的质粒dna比开环构型的迁移速度慢。

65、southern杂交时，若目的片段dna>15～20kb时，要进行脱嘌呤处理。

66、三亲接合法中的“三亲”是指运载菌、接合辅助菌、蓝藻。

67、焦磷酸二乙酯可以破坏或抑制rna酶活性。

68、ti辅助质粒不能独立完成植物转基因的过程，但它本身具有特定的功能。

69、质粒dna提取实验中，最后溶解质粒dna的rte溶液中的rna酶可以降解rna。

70、离心收集菌液时，需要先使用天平平衡才能离心，离心时可以不带离心管盖平衡。

71、超声破碎菌体细胞时，要将样品放在冰浴中，其作用是超声破碎过程中会产热，冰浴可以降低温度，也可以维持样品的活性。

72、外源基因在大肠杆菌中的诱导表达，使用iptg的浓度一般通过实验摸索出来。

73、蓝白筛选不能区分转化子与非转化子。

74、荧光pcr定量方法中的相对定量是通过检测目的基因相对于内参基因的表达变化来实现定量的，可以比较来源不同的样本目的基因表达量的差异。

75、western blot是将待检测蛋白质（或酶）经聚丙烯酰胺凝胶电泳后，转移到固相载体上，再用“抗体-抗原”免疫反应或“dna-蛋白质”结合反应鉴别膜上的蛋白质。